Quantification of psychrotrophic bacteria and molecular identification of Pseudomonas fluorescens in refrigerated raw milk / Quantificação de bactérias psicrotróficas e identificação molecular de Pseudomonas fluorescens em leite cru refrigerado

In this study, we investigated the contamination of refrigerated raw milk produced in the western region of Paraná, southern Brazil, with psychrotrophic microorganisms, aiming to assay the proteolytic activity of the isolates and to identify Pseudomonas fluorescens, the main proteolytic species associated with the spoilage of milk products. Raw milk samples from 50 dairy farms were submitted to the counting of psychrotrophic microorganisms, being the microbiota characterized by its mesophilic behavior and proteolytic capacity, besides molecular identification of P. fluorescens. Of the samples evaluated, 94% had psychrotrophic counts ranging from 3 to 7.1 log CFU mL-1, and 48.5% of these showed mesophilic behavior. Of the isolates, 48.0% had proteolytic activity in at least one evaluated temperature (21 and 30°C), and 39.3% had proteolytic activity in both temperatures. Among the 61 isolates submitted to molecular identification by polymerase chain reaction (PCR), 86.8% contained the expression of the 16S gene characteristic for P. fluorescens. In this study, we demonstrated that P. fluorescens is the most prevalent psychrotrophic bacteria species in raw refrigerated milk and their proteolytic ability poses high risks to the dairy industry.(AU)

No presente estudo, investigamos a contaminação do leite cru refrigerado produzido na região oeste do Paraná, sul do Brasil, com micro-organismos psicrotróficos, visando testar a atividade proteolítica dos isolados e identificar Pseudomonas fluorescens, a principal espécie proteolítica associada à deterioração de produtos lácteos. Amostras de leite cru de 50 fazendas leiteiras foram submetidas à contagem de micro-organismos psicrotróficos, caracterizando-se a microbiota por seu comportamento mesofílico e sua capacidade proteolítica, além de identificação molecular de P. fluorescens. Entre as amostras avaliadas, 94% apresentaram contagem psicrotrófica variando de 3 a 7,1 log UFC mL-1 e 48,5% destas apresentaram comportamento mesofílico. Entre os isolados, 48,0% apresentaram atividade proteolítica em pelo menos uma das temperaturas testadas (21 e 30°C) e 39,3% apresentaram atividade proteolítica em ambas as temperaturas. Entre os 61 isolados sub-metidos à identificação molecular por reação em cadeia da polimerase (PCR), 86,8% continham expressão do gene 16S característico de P. fluorescens. Neste estudo, demonstramos que P. fluorescens é a espécie de bactérias psicrotróficas mais prevalente em leite refrigerado cru e sua capacidade proteolítica promove elevados riscos de deterioração para a indústria de laticínios.(AU)

Technology and safety assessment for lactic acid bacteria isolated from traditional Bulgarian fermented meat product "lukanka"

Abstract The present work discusses the technological and new selection criteria that should be included for selecting lactic acid bacteria for production of fermented meat. Lactic acid bacteria isolated from Bulgarian traditional fermented "lulanka" salami was studied regarding some positive technological parameters (growth at different temperature, pH, and proteolytic activity). The presence of genes related to the virulence factors, production of biogenic amines, and vancomycin resistance were presented in low frequency in the studied lactic acid bacteria. On the other hand, production of antimicrobial peptides and high spread of bacteriocin genes were broadly presented. Very strong activity against L. monocytogenes was detected in some of the studied lactic acid bacteria. In addition, the studied strains did not present any antimicrobial activity against tested closely related bacteria such as Lactobacillus spp., Lactococcus spp., Enterococcus spp. or Pediococcus spp. To our knowledge this is the first study on the safety and antimicrobial properties of lactic acid bacteria isolated from Bulgarian lukanka obtained by spontaneous fermentation.

Interference of different storage temperatures in the dynamics of probiotic Bifidobacterium spp. and Streptococcus thermophilus starter cultures in fermented milk / Interferência de diferentes temperaturas de armazenamento na dinâmica de Bifidobacterium spp. probióticas e cultura starterStreptococcus thermophilus em leite fermentado

The variations of temperature during the cold chain can impair the quality of live foods, such as fermented milks. Probiotic bacteria are commonly added to food to provide the consumer with beneficial effects. Nevertheless, the concentration of probiotic in the end products should be elevated to ensure functionality. The aim of this study was to evaluate the viability of probiotic strains of bifidobacteria and starter strain of Streptococcus thermophilus in fermented milks at storage temperatures of 4 and 10ºC, for a period of 28 days. Commercial cultures of Bifidobacterium spp. were added to milk fermented by Streptococcus thermophillus and stored for 28 days at 4 and 10ºC. During this period, bifidobacteria and S. thermophilluscultures were monitored to check their behavior in the evaluated storage conditions. Viable bifidobacteria and S. thermophillus counts showed no significant variation during storage at 4 and 10ºC (p < 0.05), indicating that both of these conditions are adequate for maintaining their initial concentrations. The results indicate that the storage conditions usually adopted in sale establishments of dairy products are suitable to maintain bifidobacteria and S. thermophillus cultures in fermented milk.(AU)

As variações de temperatura que ocorrem durante a cadeia refrigerada da produção leiteira pode interferir na qualidade de alimentos bioativos, como leites fermentados. Bactérias probióticas são usualmente adicionadas a alimentos, visando a oferecer ao consumidor efeitos benéficos. O objetivo deste trabalho foi avaliar a viabilidade de culturas probióticas de bifidobactérias e de cultura starter de Streptococcus thermophilus em leites fermentados, armazenados nas temperaturas de 4 e 10ºC por um período de 28 dias. Culturas comerciais de Bifidobacterium spp. foram adicionadas ao leite fermentado produzido com Streptococcus thermophillus e estocados por 28 dias a 4 e 10ºC. Nesse período, as culturas de Bifidobacterium spp. e Streptococcus thermophillus foram monitoradas, com o objetivo de verificar seus comportamentos nas temperaturas de estocagem testadas. As contagens de ambos os micro-organismos não apresentaram variação significativa ao longo do período de estocagem a 4 e a 10ºC (p < 0,05), indicando que as duas temperaturas testadas podem oferecer condições adequadas de conservação desse produto. Os resultados obtidos indicaram que as condições de conservação de alimentos usualmente adotadas para produtos lácteos em estabelecimentos comerciais são adequadas para manter as contagens de bifidobactérias e Streptococcus thermophillus em leites fermentados.(AU)

Inspected and non-inspected chilled chicken carcasses commercialized in Viçosa, MG, Brazil: microbiological parameters and Salmonella spp. occurrence / Carcaças de frango refrigeradas inspecionadas e não-inspecionadas comercializadas em Viçosa, MG, Brasil: parâmetros microbiológicos e ocorrência de Salmonella spp

Sixty samples of chilled chicken carcasses submitted (30) and not submitted (30) to Brazilian inspection services were analyzed to investigate if inspected and non-inspected chilled carcasses represented different food safety risks in the region of Viçosa, MG, Brazil. The mean counts of indicator microorganisms (mesophilic aerobes, Enterobacteriaceae, total coliforms and Escherichia coli) of samples belonging to the inspected and non-inspected lots did not present significant differences (P>0.05). Also, no significant differences (P>0.05) were observed for the numbers of Salmonella spp. and E. coli (higher than 2log cfu g-1) between samples submitted or not to inspection. Statistical differences were observed between the two sample classes only for the numbers of mesophilic aerobes higher than 4 and 5log cfu g-1 (P<0.05). The obtained results indicated the limitations of microbiological parameters to differentiate inspected and non-inspected chilled chicken carcasses commercialized in the specific studied area.

Sessenta amostras de carcaças de frango refrigeradas fiscalizadas (30) e não fiscalizadas (30) por serviços brasileiros de inspeção foram analisadas para investigar se carcaças refrigeradas inspecionadas ou não apresentam diferentes riscos alimentares na região de Viçosa, MG, Brasil. As médias de contagens de microrganismos indicadores de higiene (aeróbios mesófios, Enterobacteriaceae, coliformes e Escherichia coli) de amostras inspecionadas ou não inspecionadas não apresentaram diferenças significativas (P>0,05). Também não foram observadas diferenças significativas entre amostras inspecionadas e não inspecionadas com resultados positivos para Salmonella spp. e E. coli (contagens acima de 2log cfu g-1). Diferenças significativas (P<0,05) foram observadas somente entre os números de amostras com contagens de aeróbios mesófilos superiores a 4 e 5log cfu g-1. Os resultados obtidos indicam as limitações dos parâmetros microbiológicas para diferenciar carcaças de frango inspecionadas ou não na região específica onde o estudo foi conduzido.

Retrospective study on Porcine circovirus-2 by nested pcr and real time pcr in archived tissues from 1978 in Brazil

Porcine circovirus-2 (PCV-2) infection is currently considered an important disease of swine. The pathogenic agent was first described in Brazil in 2000. This study detected the PCV-2 DNA in four Brazilian pig tissues collected between 1978 and 1979. This observation is the oldest description of this virus in Brazil.

Glucuronidase activity of Escherichia coli isolated from chicken carcasses

To identify Escherichia coli through the production of â-D-glucuronidase (GUD), 622 suspect cultures were isolated from chicken carcasses and plated in PetrifilmTM EC. Of these cultures, only 44 (7.1 percent) failed to produce GUD. This result indicates the usefulness of GUD production for estimating E. coli populations in chicken.

Práticas de produção aplicadas no controle de contaminação microbiana na produção de leite cru / Producing practices applied on the control of microbiological contamination in raw milk production

A qualidade do leite cru é influenciada diretamente pelas condições de higiene na ordenha earmazenamento, bem como sanidade dos animais. Isso determina que a adoção de Boas Práticas de Produção éfundamental para obtenção de produtos final com baixas contagens microbianas, característica indicativa de boa qualidade. Visando avaliar a eficácia de práticas higiênicas durante o procedimento de ordenha em uma propriedade rural, pontos específicos foram selecionados e amostrados em duas etapas: uma fase inicial, com as práticas do produtor, e uma faseseguinte, em que práticas higiênicas específicas foram adotadas (soluções de cloro para pré-dipping, a 750ppm, e higiene de utensílios, a 300 ppm, além de descarte de primeiros jatos de leite). As amostras foram coletadas em 3 repetições em cada etapa e submetidas a contagens de aeróbios mesófilos (Petrifilm™ AC, 35ºC por 48h), psicrotróficos (superfície de ágar padrão de contagem, 7ºC por 10 dias), coliformes totais e Escherichia coli (Petrifilm™ EC, 35ºC por 48h). Osresultados finais obtidos foram comparados em cada etapa. Na etapa inicial os grupos identificados como principais contaminantes da linha de ordenha foram os aeróbios mesófilos e psicrotróficos, presentes em altos níveis nos tetos e leite dos animais. As práticas adotadas geraram redução da contaminação dos microrganismos indicadores pesquisados em vários pontos da linha de ordenha, indicando a eficácia das soluções de cloro para higienização de tetos dos animais eutensílios de ordenha.

The quality of raw milk is directly influenced by hygiene conditions during milking and storage, and also by animal sanity. Considering these characteristics, Good Producing Practices (GPP) must be adoptedsystematically in milk production in order to obtain final products with low microbial counts, what is indicative of quality. A dairy farm was selected to evaluate the efficiency of some GPP during milking process, when milk and surface samples were collected from specific milking steps in two stages: a first one, when hygienic procedures from the farmers were conducted, and a following one, when specific hygienic procedures were adopted (chlorine solutions for pre-dipping, at 750ppm, and utensils cleaning, at 300ppm, and discard of the forestrip milk). The samples were collected in threerepetitions in each phase and submitted to microbiological analysis of mesophilic aerobes (Petrifilm™ AC, 35ºC for 48h),psychrotrophics (surface of plate count agar, 7ºC for 10 days), total coliforms e Escherichia coli (Petrifilm™ EC, 35ºC for48h). The final results were then compared in each phase. At the initial phase, mesophilic aerobes and psychrotrophics were identified as the main contaminants of milking procedure by their high levels in the teats and milk. The adopted procedures generated reduction of microbial contamination in several sampling points, indicating the efficacy of chlorine solutions for hygiene of teats and milking utensils.

Antimicrobial activity of autoclaved and non autoclaved copaiba oil on Listeria monocytogenes / Atividade antimicrobiana de óleo de copaíba autoclavado e não autoclavado sobre Listeria monocytogenes

The aim of this study was to evaluate the antimicrobial effect of different copaiba oil concentrations against the growth of Listeria monocytogenes, and analyze differences in inhibition of microorganisms with autoclaved and non autoclaved oil. This study provided an agar diffusion test with six isolates of bacteria and six different concentrations of autoclaved or non autoclaved copaiba oil and a negative control. The results showed sensitivity of five L. monocytogenes isolates related to the 10 percent autoclaved solution of copaiba oil. Four strains also showed sensitivity to the 5 percent autoclaved solution and one to 2.5 percent autoclaved solution. The 10 percent non autoclaved oil solution showed growth inhibition only for two strains. These results had pointed the 10 percent autoclaved solution of copaiba oil with higher inhibition as all other solutions and concentrations tested (P<0.05). For the other concentrations of both solutions, the 5 and 2.5 percent autoclaved and 10 percent non autoclaved solutions had presented statistically equal. All other concentrations of both copaiba solutions and the negative control did not presented any bacteria inhibition. In conclusion, the results of this study suggest that the autoclaved copaiba oil may be a potential new agent source for infection control or for food preservation, inhibiting the growth of food-borne bacteria such as L. monocytogenes.

Os objetivos deste estudo foram avaliar o efeito antimicrobiano de diferentes concentrações de óleo de copaíba contra o crescimento de Listeria monocytogenes e analisar as diferenças na inibição do microorganismo com soluções do óleo autoclavadas e não autoclavadas. Para tanto, foi realizado um teste de difusão em ágar, com seis isolados do microrganismo originários de produtos cárneos, seis concentrações de ambas as soluções e um controle negativo. Os resultados mostraram sensibilidade de cinco cepas de L. monocytogenes em relação à solução 10 por cento de óleo de copaíba autoclavada. Quatro isolados também apresentaram sensibilidade para a solução de 5 por cento autoclavada e apenas um foi sensível à solução de 2,5 por cento autoclavada. A solução 10 por cento não autoclavada apresentou inibição do crescimento de apenas dois isolados. Esses resultados apontaram a solução autoclavada de 10 por cento do óleo de copaíba com maior inibição em relação a todas as outras soluções e concentrações testadas (P<0,05). As soluções 5 e 2,5 por cento autoclavadas e a solução 10 por cento não autoclavada apresentaram-se estatisticamente iguais. Todas as outras concentrações das soluções de copaíba e o controle negativo não apresentaram inibição das bactérias. Os resultados deste estudo sugerem que o óleo de copaíba autoclavado pode ser uma potencial fonte de novos agentes para o controle de infecção ou para a conservação dos alimentos, inibindo o crescimento de bactérias de origem alimentar como L. monocytogenes.

Prevalência do complexo teníase-cisticercose na zona rural do município de Viçosa, Minas Gerais / Prevalence of Taeniasis-cysticercosis complex in the rural area of Viçosa-MG, Brazil

A teníase é uma doença que se manifesta no ser humano em decorrência da presença da forma adulta da Taenia sp., enquanto a cisticercose decorre da infecção pelo estágio larvar da Taenia sp. ou Taenia solium, no caso dos suínos e humanos. Foi realizado um estudo transversal visando a determinar a prevalência de cisticercose em suínos e de teníase em 176 propriedades localizadas na zona rural de Viçosa, Minas Gerais (MG). Foram coletadas amostras de sangue de 226 suínos e fezes de 266 humanos, além da realização de um inquérito epidemiológico. Não foi identificada teníase humana, e a prevalência da cisticercose suína foi de 0,4 por cento. As informações obtidas mostraram que a maioria das pessoas possuía o hábito de consumir carne suína não inspecionada; entretanto, todas as pessoas se alimentavam da carne bem aquecida. Em apenas 1,1 por cento das propriedades, o esgoto era depositado diretamente no solo e em 99,4 por cento destas a água era canalizada, enquanto 88,1 por cento dos suínos eram criados presos. Concluiu-se que, na zona rural do município de Viçosa-MG, a prevalência do complexo teníase-cisticercose foi baixa, mostrando ainda um nível de contaminação inferior ao de outros municípios onde o complexo foi estudado.

Taeniasis occurs due to the presence of the adult form of Taenia sp. in human beings, and cysticercosis is caused by the presence of the larval stage of T. solium in pigs and humans. A transversal study was conducted aiming to determine the prevalence of porcine cysticercosis and Taeniasis in 176 farms located in rural areas of Viçosa-MG. Blood samples of 226 pigs, and feces samples of 266 humans were collected. An epidemiological survey has also been done. We found a prevalence of 0.4 percent of porcine cysticercosis and Taeniasis has not been found. The epidemiological data has shown that although most people consumed non-inspected pork, it used to be prepared well-done. Data showed that 88.1 percent of the pigs are reared in confinement in only 1.1 percent of the properties the sewer was disposed on the soil, and 99.4 percent used pipes for water distribution. It can be concluded that the prevalence of the Taeniasis-cysticercosis complex in rural areas of Viçosa (State of Minas Gerais) is lower than in other similar regions.

Aspectos zoonóticos de Helicobacter spp / Zoonotic aspects of Helicobacter spp

Helicobacter pylori é o principal agente causador de gastrite superficial crônica em humanos, eparticipa de forma significativa no desenvolvimento de úlceras pépticas e de neoplasias gástricas. Atualmente já éconhecida a participação de bactérias do gênero Helicobacter na patogênese de enfermidades gástricas em humanos e em animais domésticos e selvagens, porém tais mecanismos ainda não estão totalmente esclarecidos. A transmissão zoonótica do gênero Helicobacter tem sido sugerida devido à presença de microrganismos gástricos com morfologia similar a este, no estômago de várias espécies animais (cães, gatos, suínos, bovinos, ovinos, aves, furões, porcos de Guiné, macacos, camundongos, ratos, hamsters, marmotas, raposas, guepardos, golfinhos, baleia beluga e outros). Por essa razão os animais domésticos, especialmente, têm sido freqüentemente relacionados como potenciais fontes de infecção de Helicobacter spp.para os seres humanos, uma vez que a transmissão pode ocorrer por diversas fontes de contaminação (oral-oral, fecal-oral, vetores, água e alimentos de origem animal). Essas características demonstram a relevância de estudos que esclareçam o papel zoonótico de Helicobacter spp., evidenciando assim a sua importância para a Saúde Pública.

Helicobacter pylori is the principal agent cause of chronic superficial gastritis in humans, and itparticipates significantly in the development of peptic ulcers and gastric cancers. Nowadays, is known the participation of bacteria of the gender Helicobacter in the pathogenesis of gastric illnesses in humans and in domestic and wild animals, however such mechanisms are not still totally explained. The zoonotic transmission of the gender Helicobacter has beensuggested due to the presence of gastric microorganisms with similar morphology to this in the stomach of several animalspecies (dogs, cats, swine, bovine, ovine, birds, ferrets, Guinea pigs, monkeys, mice, rats, hamsters, marmots, foxes, cheetahs, dolphins, beluga and others). For this reason, especially the domestic animals have been frequently related as potentials sources of infection of Helicobacter spp. for the human, once the transmission can happen for several rotes ofcontamination (oral-oral, fecal-oral, vectors, water and foods of animal origin). Those characteristics demonstrate the relevance of studies to explain the zoonotic paper of Helicobacter spp., avoiding damages in the context of the public health.

Análise e monitoramento de pontos críticos no abate de frangos utilizando indicadores microbiológicos / Analysis and monitoring of critical points in the poultry slaughter using microbiological indicators

A presença de microrganismos indicadores de contaminação na linha de abate de frangos foi determinada visando identificar os possíveis pontos de controle e oferecer uma opção para o monitoramento ou a verificação pelo sistema "Análise de Perigos e Pontos Críticos de Controle" (APPCC). A contaminação superficial das carcaças foi determinada pela enumeração de microrganismos aeróbios mesófilos, coliformes totais, coliformes termotolerantes e de Escherichia coli nas seguintes fases de abate: A - antes do primeiro chuveiro de higienização, B - após o primeiro chuveiro, C - após a evisceração manual, D - após o chuveiro de lavagem final e E - na saída do pré-resfriamento. Não houve diferença significativa (P<0,05) entre as médias de mesófilos, coliformes totais e termotolerantes, entre as fases A, B, C e D. Entretanto, as médias obtidas para esses microrganismos indicadores na fase E (pré-resfriamento) foram significativamente menores. Não houve diferença significativa entre as médias de Escherichia coli nas cinco fases. As chances de contaminação (Razão de Chances) por mesófilos foram maiores na fase A e por coliformes na fase C. Entre os parâmetros analisados, os níveis de contaminação por mesófilos, coliformes totais e termotolerantes foram os mais indicados para monitoramento e verificação de um plano APPCC no abate de aves. Os resultados obtidos indicaram que a fase de pré-resfriamento pode ser considerada um importante ponto crítico de controle, uma vez que foi capaz de reduzir a contaminação microbiológica de forma significativa.

Hygiene indicator microorganisms in a poultry slaughter was evaluated during the processing in order to identify potential critical control points and allow options for monitoring or verification by Hazard Analysis Critical Control Point (HACCP) system. Microbiological superficial contamination of chicken carcasses was establish by the enumeration of mesophilic aerobes, total coliforms, thermotolerant coliforms and Escherichia coli in the following steps of processing: A - before the first hygienic shower, B - after the first hygienic shower, C - after manual evisceration, D - after final washing shower, and E - after the chiller tank. The mean counts of mesophilic aerobes, total and thermotolerant coliforms was not significantly different (P<0.05) in the steps A, B, C and D. However, the mean values of these microorganisms in step E (after chilling) was significantly lower when compared to the one obtained in the other steps. The mean counts of Escherichia coli were not significantly different, independently of the processing step analyzed. The chances of contamination were estimated by Odds Ration, and it was observed that chances were higher in the step A for mesophilic aerobes, and in the step C for coliforms. Considering the analyzed parameters, the levels of contamination by mesophilic aerobes, total and thermotolerant coliforms were the most suitable for monitoring and verification of a HACCP system in a poultry processing plant. The obtained results indicate that the chilling can be considered as an important critical control point, once this procedure was able to reduce significantly the microbiological contamination.

Listeria spp. associated to different levels of autochthonous microbiota in meat, meat products and processing plants

High levels of microbial contamination, commonly found in animal origin foods and food processing environments, are able to hinder the growth of pathogens in these products and interfere in the results of laboratory analyses for detection of these pathogens. With the aim of verifying the possible interference of the autochthonous microbiota encountered in meat and meat products and processing plants over the presence of Listeria spp., 443 samples, collected from 11 meat retail establishments, were submitted to microbiological analysis to determine the levels of mesophilic aerobes, total coliforms and Escherichia coli and the presence of Listeria spp., according to the methodology proposed by the USDA. The results did not show evident interference of the autochthonous microbiota over Listeria spp., once the genus was detected even in the meat, meat products and environmental samples with high levels of contamination by mesophilic aerobes and coliforms.

Altos níveis de contaminação microbiana, usualmente encontrados em alimentos de origem animal e nos ambientes de processamento, podem inibir a multiplicação de microrganismos patogênicos nesses produtos e interferir nos resultados das análises laboratoriais para o isolamento desses patógenos. Com o objetivo de verificar as possíveis interferências da microbiota autóctone encontrada na carne, produtos cárneos e plantas de processamento sobre a presença de Listeria spp., 443 amostras, coletadas em 11 estabelecimentos processadores, foram submetidas a análises microbiológicas para determinação dos níveis de contaminação por aeróbios mesófilos, coliformes totais e Escherichia coli e para verificação da presença de Listeria spp., de acordo com a metodologia proposta pelo USDA. Os resultados obtidos não mostraram uma interferência evidente da microbiota autóctone sobre Listeria spp., uma vez que esse gênero foi detectado mesmo nas amostras de carne e produtos cárneos e amostras ambientais e de superfície de equipamentos que apresentaram altos níveis de contaminação por aeróbios mesófilos e coliformes.

Características da produção leiteira da região do agreste do estado de Pernambuco, Brasil / Characteristics of the milk production of the agreste region of the state of Pernambuco, Brazil

O Agreste pernambucano é caracterizado por uma economia diversificada, com diferentes cultivos, além da pecuária de leite e de corte. Em 2004 o Estado produziu 398 milhões de litros de leite, o que representou 14,7% da produção da Região Nordeste e 1,7% da produção Nacional. Este trabalho teve como objetivo caracterizar as propriedades leiteiras da região Agreste do Estado de Pernambuco, observando condições e fatores que pudessem interferir na qualidade do leite. Foram selecionadas 41 propriedades leiteiras da região. Observou-se o predomínio das propriedades de pequeno porte, com até 25 (43,9%) animais em lactação, sendo ordenha manual em 36 (87,8%) das propriedades. Em relação às práticas de higiene na ordenha, 16 (39,0%) dos produtores lavavam os tetos antes da ordenha, mas apenas 4 (9,8%) realizavam pré-dipping e 34 (82,9%) ordenhavam na presença do bezerro. Apenas 5 (12%) das propriedades realizavam algum tipo de tratamento da água utilizada para higienização de instalações e equipamentos, mesmo a água para consumo humano era tratada em apenas 43,9% das propriedades. A refrigeração do leite era realizada por 10 (24,4%) propriedades em tanques comunitários. Quanto a sanidade do rebanho 39(95,1%) proprietários realizavam vacinação para febre aftosa e 23 (56,1%) para brucelose, enquanto 10(24,4%) realizavam teste para tuberculose. As condições de produção se revelaram precárias quanto às estruturas nas propriedades, mostrando a necessidade da melhoria das instalações e manejo dos animais e, principalmente, a implantação de Boas Práticas na ordenha, adequadas à realidade local.

The Agreste region in the state of Pernambuco is characterized by a diversified economy, with differentcultivars, besides the daily and beef farms. In 2004 the State produced 398 million liters of milk; it represented 14.7% of the Northeast Region production and 1.7% of the National production. The aim ofthis work was to characterize the milk properties of the Agreste region of Pernambuco, observingconditions and factors that could interfere with milk quality. In the survey, 41 milk farms were selected inthe region. Small milk farms were the most common found, with less than 25 (43.9%) animals in lactation,and 36 (87.8%) farms held a manual milking process. In relation to hygiene practices during milking, 16(39.0%) of the producers washed the teats before beginning, but only 4 (9.8%) performed pre-dippingand 34 (82.9%) milked in the presence the calf. Only 5 (12%) farms applied some treatment to the waterused for cleaning installations and equipment, even the water for human consumption was treated inonly 43.9% of the farms. Milk refrigeration was performed in 10 (24.4%) farms in communitarian tanks. Asfar as animal health is concerned, 39 (95.1%) owners vaccinated for food and mouth disease and 23(56.1%) for brucellosis, while 10 (24.4%) tested for tuberculosis. Regarding the farms structure theproduction conditions were precarious, showing the need of improving the structure itself and animalhandling. As well as the implementation of Good Manufacturing Practices in the milking process, properto the local reality.

Utilização de plasma de cavalo no teste de coagulase em Estafilococos isolados de leite cru / utilization of horse plasma in coagulase test for Staphylococci isolated from raw milk

Estafilococos têm grande importância na indústria de alimentos por serem associados a surtos de intoxicação alimentar, pela ação de suas exterotoxinas. A produção dessas substâncias tem alta correlação com a produção da enzima coagulase, que é detectada na identificação de cepas potencialmente patogênicas. Esse teste é tradicionalmente realizado com plasma de coelho liofilizado ou pela sua separação de sangue coletado de coelhos. O plasma liofilizado tem alto custo e a punção cardíaca, além de ser bastante cruenta, permite aobtenção apenas de pequenos volumes de material. Este trabalho tem como objetivo verificar a viabilidade da utilização de um material alternativo ao plasma de coelho, neste caso o plasma de cavalo, no teste de coagulase para estafilococos isolados de leite cru. Assim, 410 colônias típicas e atípicas de estafilococos isolados de leite cru foram submetidas ao teste de coagulase utilizando-se dois plasmas. Os resultados identificaram 284 (69,26 por cento) colônias coagulase positivas e 126 (30,73 por cento) coagulase negativas, com concordância de 100 por cento entre os dois plasmas. Os resultados obtidos indicam que a utilização do plasma de cavalo pode ser uma alternativa viável na pesquisa de estafilococos coagulase positivos em leite cru.

Listeria monocytogenes e Salmonella spp. em leite cru produzido em quatro regiões leiteiras no Brasil: ocorrência e fatores que interferem na sua detecção / Listeria monocytogenes and Salmonella spp. in raw milk produced in four milk-producing regions in Brazil: occurrence and factors that interfere in their detection

O Brasil tem uma grande produção leiteira, e, embora seu comércio seja ilegal, o leite cru é consumido por uma parcela da população, principalmente na zona rural. Visando avaliar o risco associado ao consumo de leite cru, esse trabalho estudou a ocorrência de Listeria monocytogenes e Salmonella spp. em leite cru produzido em quatro importantes regiões produtoras de leite do Brasil, fazendo uma correlação com os níveis de contaminação com outros microrganismos indicadores de qualidade do produto (bactérias aeróbias mesófilas totais, coliformes totais e Escherichia coli), bem como investigou a presença de substâncias químicas empregadas no manejo do gado bovino (sanitizantes, antibióticos e defensivos agrícolas)...

Hazards in non-pasteurized milk on retail sale in Brazil: prevalence of Salmonella spp, Listeria monocytogenes and chemical residues

A instabilidade do mercado de leite no Brasil força pequenos produtores de leite a procurar alternativas de comércio de sua produção, o que inclui a venda de leite cru para indivíduos que dão preferência a esse tipo de leite. Considerando a importância desse mercado e os conhecidos riscos à saúde que o consumo de leite cru pode representar, este estudo avaliou a qualidade microbiológica e a presença de Listeria monocytogenes, Salmonella spp., resíduos de cloretos, antimicrobianos e inseticidas (organofosforados e carbamatos) em leite cru produzido em 210 propriedades leiteiras localizadas em quatro importantes estados produtores de leite no Brasil (Paraná, São Paulo, Minas Gerais e Rio Grande do Sul). Em 66% das propriedades selecionadas, a ordenha era manual. Em 33% a ordenha era semi-automática (ordenha mecânica balde ao pé) e em apenas 1% o sistema de ordenha e armazenamento era totalmente mecânico (sistema fechado). Todas as amostras de leite cru foram negativas para L. monocytogenes, Salmonella spp e resíduos de cloretos. As contagens de aeróbios mesófilos foram superiores a 105 UFC/mL em 75,7% das amostras. Em 80,4%, as contagens de coliformes foram superiores a 102 UFC/mL. Escherichia coli foi detectada em 36,8% das amostras. Inseticidas e resíduos de antibióticos foram observados em 74,4% e 11,5% das amostras, respectivamente. Níveis inaceitáveis de microrganismos indicadores de higiene, inseticidas e resíduos de antibióticos foram considerados fatores de risco mais importantes que os dois patógenos estudados.

Evaluation of Petrifilm tm EC and HS for total coliforms and Escherichia coli enumeration in water

Petrifilmo EC e HS foram comparados ao método do Número Mais Provável (NMP) para determinar sua eficiência na enumeracão de coliformes totais e E. coli em 145 amostras de água (76 de água in natura e 69 de água de abastecimento). Em água in natura, Petrifilmo HS e EC mostraram boa correlacão com o método de NMP. Em água clorada (< 20 col/100 mL e negativas) a concordância foi baixa. Para enumeracão de E. coli, Petrifilmo EC mostrou boa correlacão com o método de NMP. Os resultados indicaram que Petrifilmo EC e HS podem ser usados com seguranca para enumeracão de coliformes totais e E. coli em água, desde que as contagens esperadas sejam maiores que 20/100 mL.

Enumeração de coliformes totais e E. coli em água de abastecimento e de efluentes da Ilha do Mel-PR, utilizando-se placas de Petrifilm EC e HS / Enumeration of total coliforms in drinking water and water from the creeks from Ilha do Mel-PR, using Petrifilm EC and HS systems

A Ilha do Mel (longitude de 48º20' e latitude 25º 34', sul) pertence ao município de Paranaguá, litoral do Paraná. A ilha é hoje o principal ponto turístico do litoral paranaense, recebendo milhares de turistas todos os anos. O sistema de saneamento básico da ilha é precário, existindo fossas próximas a poços d'água e despejo de esgotos domésticos diretamente na rede de drenagem. Avaliou-se a qualidade microbiológica da água de abastecimento e efluentes da Ilha do mel. Com a indisponibilidade laboratorial na Ilha, optou-se por utilizar o sistema Petrifilm EC e HS, para enumeração de coliformes totais e E. coli, que apresenta grande praticidade na execução das análises e resultados em curto tempo. Foram analisados poços, rios, minas, fontes, canais de drenagem, lagoa, bicas, rede de drengem e captações de morros, totalizando 72 amostras colhidas nos diversos povoados da ilha: Encantadas, Brasília, Farol, Praia Grande e Fortaleza. Os resultados demonstraram duas realidades distintas. Na região de Encantadas observou-se alta contaminação de águas superficiais com despejo direto de esgoto, mas o lençol freático estava preservado. Nas demais regiões praticamente não há rios perenes, por isso não há onde despejar esgotos, recorrendo-se a fossas, que são as prováveis causas da contaminação observada no lençol freático.

Assessment of the efficiency of SimPlate tm total plate count color indicator (TPC CI) to quantify mesophilic aerobic microorganisms in pasteurized milk

The SimPlate (tm) TPC CI system is a rapid method to count mesophilic aerobic microorganisms (MAM) in foods, based on the use of resazurine to indicate bacterial growth. Its efficiency in pasteurized milk was evaluated using 142 pasteurized milk samples (38 type A, 43 type B and 61 type C) collected in Londrina, PR. The standard plating method, using Plate Count Agar (PCA) was used for comparison. The plates of both systems were incubated at 35§C and read after 24h and 48h. The occurrence of false-positive and false-negative wells and the predominant microorganisms in them were also evaluated. The results were compared by simple correlation and mean variance analyses. The correlation (r) and mean variance values were 0.6811 and 0.7583 for the results obtained after 24h, respectively, and 0.9126 and 0.0842 for the results obtained after 48h, respectively. These results indicate that the performance of the system increases when the plates are incubated for 48h. When the three types of milk were evaluated separately, these values were 0.9285 and 0.0817 for type A milk, 0.9231 and 0.0466 for type B milk and 0.7209 and 0.1082 for type C milk. These results indicate that the better the quality of the milk the better the performance of SimPlate (tm) TPC CI. False-negative wells, found more frequently in samples with high MAM counts, were caused by Gram positive microorganisms, poorly detected by the SimPlate (tm) TPC CI system because they grew slowly and had low reduction capacity. The results indicated a higher efficiency of the SimPlate (tm) TPC CI system in the reading at 48h.

Use of readycult (tm) - LMX for enumeration of total coliforms and Escherichia coli in milk

Readycult (tm) - LMX is a rapid method to test for the presence of total coliform bacteria and Escherichia coli in water, giving results in 24h. It is based on reactions of specific microbial enzymes or indicator nutrients of the medium. The goal of this paper was to study the use of Readycult (tm) - LMX to detect total coliform and E. coli in milk. One hundred twenty five samples of pasteurized and raw milk, collected in Londrina, PR, Brazil, were tested simultaneously by the most probable number (MPN) method using Brilliant Green Bile Lactose Broth (2 per cente) (BRILA) and Readycult (tm) - LMX. The Readycult (tm) - LMX test was evaluated for sensitivity, simplicity, and speed of results. There was a significant correlation between the results obtained by the two methods for total coliforms (r: 0.8224) and for E. coli (r: 0.8603). The two methods yielded similar results, but Readycult (tm) - LMX was easier to use. In addition, results were available as early as 24h.